産卵と採卵
カエルの産卵はホルモンによってコントロールされている。そのため、ホルモンを注射することによって、産卵を促すことが可能である。ただし、注入量と注射の時間設定、水温のコントロールなどをうまくやらないと、産卵しなかったり、産卵しても未受精卵が多かったりするので、常に、最良の条件をもとめて、試行錯誤が必要である。以下に当研究室で現在比較的うまくいっているやりかたを示す。水温条件は約20℃。
A 注射用ホルモン溶液
- 0.6% NaCl 水溶液を100ml作り、オートクレーブで滅菌しておく。
- ゴナトロピン(胎盤性性腺刺激ホルモン 帝国臓器)を0.6%
NaCl水溶液で溶かして、1000unit/mlのホルモン溶液をつくる。(15ml
の滅菌済プラスチックチューブを使って10ml作っておくとよい。)
- 0.5〜1mlずつ滅菌済のエッペンチューブに分注し、冷凍庫で保存する。
B
ホルモン注射による排卵誘発
- 産卵させる予定日の二日前にオスに200〜250unit(200〜250μl)のホルモン溶液を注射しておく。
- 予定日の前日、水切かごに一晩以上くみおいた水道水をいれ、0.15%程度の濃度になるように食塩を入れる。(当研究室では約6lのくみおき水に対して、10gの食塩を溶かしておく。)
- オスに250〜350unitメスに400〜700unitのホルモン溶液を注射する。
- 水切かごのふたをして、逃げ出さないように端をクリップで止める。
- 遮光ペイントした大きめのふたをかぶせて暗くしてやる。
- 翌日採卵する。
採卵と脱ゼリーへ
実験形態学へ